魔力宝贝最大效率提升战斗力攻略(魔力宝贝怎么加点)

admin 任务攻略 2024-09-06 1360 0

Namocell微流控单细胞分选仪让单细胞的分选和获取更加简单快速。该款台式仪器结合了三种先进技术:流式细胞术、微流控技术、液滴分配技术,从而实现精准、轻柔、高效地分选并抓取单细胞。

1.流式细胞术:细胞检测方式采用流式细胞术,利用激光激发,荧光和散射光的接收来判断细胞特性,检测精度高。Pala搭载双激光,488nm为固定配置,另外可选配405nm或561nm激光器,可检测11色荧光。

2.微流控技术:在微流控芯片中检测分离细胞,以极低的鞘液压力(<2psi)进行分选,如手工般轻柔,保持细胞活性,零损伤。

3.液滴分配技术:筛选后的目的细胞包裹在鞘液液滴中,通过微流体通道将单细胞分离至96孔板或384孔板中。

一、应用案例:

单细胞测序数据

同一细胞系通过FACS和Namocell两种不同的设备进行单细胞分选,将分选后的单细胞用同样的方式进行裂解、扩增后测序得到以下对比结果:

A.RNA序列表达比较,来自Namocell的单细胞:

1.每个细胞检测到的平均基因数更高

2.比对率更高

3.线粒体基因读数更低

4.过滤后读数更高

B.使用Namocell分选到的细胞群与使用FACS分选到的细胞群不同

C.使用FACS分选的细胞应激反应基因表达上调,而使用Namocell分选的细胞并未受影响

单克隆生长数据

分别对比了多组细胞,在同样的培养基和培养条件下,使用FACS和Namocell分选得到的单细胞进行单克隆生长,结果对比差异明显。Namocell在分选细胞过程中鞘液压力低,保持细胞活性,因而细胞呈现更好的生长状态。

二、实验基本步骤流程:

在微流体通道的特定位置,有激光照射和荧光接收,检测细胞荧光信号;

将悬浮细胞作简单的染色(也可不染色直接分离)处理之后,用移液枪转移到芯片中;

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在芯片中细胞样本,会随着芯片通路中的设计以单细胞流的方式通过微流体通道;

根据设定的荧光条件,将目的单细胞分离至孔板中(支持96孔板/384孔板)。

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三、产品优势:

在单克隆细胞培养时,手动有限稀释法是经典的分离单细胞手段之一。这种方式分离单细胞,每个孔中落进去的细胞数目符合泊松分布。依靠单细胞分选(https://www.chem17.com/st387574/product_31425693.html)仪器分离单细胞的效率,无论从分选能力还是重复性都要明显优于手动的有限稀释方法。测定一款设备分选效率的标准方法,是用荧光校准微球来分选检验。

PCR板方法的通量没有微滴方法高,但有几大优势:

1、可以有选择性进行单细胞测序,提高了测序效率;

2、每个细胞可获取的基因数量高,通常高达1万个基因以上;

3、可以做RNA全长测序。微孔方法还比较新,通量高但是技术上有些受限,包括细胞间RNA的交叉污染等问题还有待解决。

Namocell单细胞分离仪是基于PCR板方法的,简便的获取单细胞的仪器。Namocell通过微流控芯片将所需要的单个细胞分选出来,在PCR板的小管中进行单细胞cDNA放大及合成。这不但能够对细胞样本进行特异性筛选,也能够在测序中获得更大的数据量,进而提升了测序数据的质量。

四、单细胞分选工作原理:

五、适用范围:

所有40微米以下尺寸的悬浮颗粒样本,包括:细胞,酵母,细菌,噬菌体等。

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六、适用特点:

轻柔分选:鞘液压力小于2psi,提高分选细胞的活性;

轻松分选:仪器操作简单,无需专人操作维护;

灵活分选:样本浓度范围10~10^8cell/ml;可挑选百万分之一含量的极稀少样本;

无菌分选:一次性芯片,保证样本之间隔离;仪器体积小巧,可置于超净台中;

高效分选:96孔板分选不到1min,384孔板4min以内,单克隆率超过95%。

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